技術(shù)文章 / article
接下來(lái)說(shuō)的，熟悉白介素試劑盒的人都知道！
2020-05-27 瀏覽次數(shù)：1704
白介素試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法，適用于體外定量檢測(cè)人血清、血漿、組織或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中天然和重組的IL-2濃度。白介素2 (IL-2)主要由絲裂原或抗原激活的T淋巴細(xì)胞表達(dá)的。它在促進(jìn)抗原特異性增殖的T細(xì)胞克隆增殖中起重要作用。另外，IL-2也參與其他不同種類細(xì)胞的多個(gè)免疫反應(yīng)。IL-2刺激胸腺細(xì)胞增殖；刺激激活的B細(xì)胞增殖與分化；促進(jìn)單核細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化與細(xì)胞殺傷能力；誘導(dǎo)自然殺傷細(xì)胞的生長(zhǎng)與刺激這些細(xì)胞的細(xì)胞因子表達(dá)以及細(xì)胞殺傷能力；增加淋巴激活殺傷細(xì)胞(LAK)的產(chǎn)生；誘導(dǎo)少突膠質(zhì)細(xì)胞的增殖與分化。人IL-2的cDNA編碼153個(gè)氨基酸糖蛋白前體包含20個(gè)氨基酸組成的信號(hào)肽，成熟時(shí)信號(hào)肽被剪切掉。在氨基酸水平序列上，小鼠IL-2與人IL-2的序列同源性達(dá)60%。人IL-2可以在小鼠細(xì)胞中活化，但是小鼠IL-2不能在人細(xì)胞中活化。IL-2基因定位在染色體4q位點(diǎn)。
白介素試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白介素6（IL-6）水平。用純化的人白介素6（IL-6）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白介素6（IL-6），再與HRP標(biāo)記的白介素6（IL-6）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6（IL-6）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白介素6（IL-6）濃度。
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
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