| 名稱(chēng) | SRANKL試劑盒 |
| 型號(hào) | |
| 更新時(shí)間 | 2023-10-13 |
| 特點(diǎn) | SRANKL試劑盒是一種酶聯(lián)放大的兩步夾心法免疫檢測(cè)試劑盒。在此實(shí)驗(yàn)中，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和未知樣品在包被了抗IGFBP-3單克隆抗體的微孔板中溫育。溫育之后洗板，再加入辣根過(guò)氧酶標(biāo)記的抗IGFBP-3抗體。第二次溫育后再洗板，再向微孔中加入TMB底物液。之后再加入酸性終止液，用雙波長(zhǎng)450nm和620nm檢測(cè)底物的酶反應(yīng)程度。} |
產(chǎn)品展示 / PRODUCTS
- 詳細(xì)內(nèi)容
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
1、實(shí)驗(yàn)原理
SRANKL試劑盒是一種酶聯(lián)放大的兩步夾心法免疫檢測(cè)試劑盒。在此實(shí)驗(yàn)中，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和未知樣品在包被了抗IGFBP-3單克隆抗體的微孔板中溫育。溫育之后洗板，再加入辣根過(guò)氧酶標(biāo)記的抗IGFBP-3抗體。第二次溫育后再洗板，再向微孔中加入TMB底物液。之后再加入酸性終止液，用雙波長(zhǎng)450nm和620nm檢測(cè)底物的酶反應(yīng)程度。
檢測(cè)到的OD值直接與樣品中IGFBP-3的濃度成正比。實(shí)驗(yàn)使用了一套IGFB-3標(biāo)準(zhǔn)品，用標(biāo)準(zhǔn)的OD值對(duì)IGFBP-3的濃度可做出一條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，之后質(zhì)控品和未知樣品中的IGFBP-3濃度就可以從此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上定量得到。
2.成分
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3試劑盒為96孔檢測(cè)提供了足夠的試劑成份。每個(gè)試劑盒包括如下試劑成份：
試劑 | 體積/規(guī)格 | 顏色 | 重溶 |
酶標(biāo)板，96孔，包被了抗IGFBP3單克隆抗體 | 96孔 | 藍(lán)色 | 即用型 |
酶聯(lián)物 HRP標(biāo)記的抗IGFBP3單克隆抗體于Tris緩沖液中，及牛血清蛋白和百里香酚 | 1瓶 0.5ml | 紅色 | 使用酶聯(lián)物緩沖液20倍稀釋 |
酶聯(lián)物緩沖液 Tris緩沖液，及牛血清蛋白和百里香酚 | 1瓶 10ml | 紅色 | 即用型 |
標(biāo)準(zhǔn)品1—5 于磷酸鹽緩沖液中，及牛血清蛋白和百里香酚。準(zhǔn)確的值請(qǐng)看瓶上標(biāo)簽 標(biāo)準(zhǔn)品是預(yù)稀釋的 使用稀釋緩沖液作為零標(biāo)準(zhǔn)品 | 5瓶 凍干品 | 黃色 | 加入1ml蒸餾水 |
稀釋緩沖液 磷酸鹽緩沖液及牛白蛋白、牛血清和百里香酚 | 1瓶 100ml | 黑色 | 即用型 |
質(zhì)控品1、2 含人血清及百里香酚 質(zhì)控品是預(yù)稀釋 | 2瓶 凍干品 | 銀色 | 加入1ml蒸餾水 |
濃縮的洗滌液 | 1瓶 10ml | 棕色 | 使用蒸餾水進(jìn)行200倍稀釋?zhuān)ńㄗh使用一個(gè)電磁攪拌器） |
TMB底物液 四甲基聯(lián)苯胺 | 1瓶 12ml | 白色 | 即用型 |
終止液 Hcl 1.0N | 1瓶 12ml | 黑色 | 即用型 |
注意：使用稀釋緩沖液作為零標(biāo)準(zhǔn)品
標(biāo)準(zhǔn)品的校準(zhǔn)是使用NIBSC/WHO 重溶的IGFBP-3，參考試劑編號(hào)93/560。
3.沒(méi)有提供的材料
1 好質(zhì)量的蒸餾水
2 移液器 50ul、100ul、1ml（使用一次性吸嘴）
3 塑料管，用于樣本稀釋
4 混合器
5 電磁攪拌器
6 洗板機(jī)
7 450nm酶標(biāo)儀，參考波長(zhǎng)650nm。
4.準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品：
使用1ml的蒸餾水重溶標(biāo)準(zhǔn)品。使用稀釋緩沖液作為零標(biāo)準(zhǔn)品。
質(zhì)控品：
使用1ml的蒸餾水重溶質(zhì)控品。
酶聯(lián)物：
制備適當(dāng)體積酶聯(lián)物溶液，例如：100ul的20倍濃縮的酶聯(lián)物加至2ml的酶聯(lián)物緩沖液中。使用混合器混勻，建議臨時(shí)制備。
洗滌液：
制備適當(dāng)體積的即用型洗滌液，通過(guò)加入199份的蒸餾水至1份的200倍濃縮的洗滌液，使用一個(gè)電磁攪拌器混勻。
5.樣本的制備
血清必須保存在2-8℃
如果實(shí)驗(yàn)沒(méi)有在24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行，建議分裝保存在-20℃，避免反復(fù)凍融。使用前，所有的樣本應(yīng)該平衡至室溫。建議使用前混勻樣本。
不能使用溶血的樣本。
6.SRANKL試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟：
在塑料試管中標(biāo)記好每個(gè)樣本
每管加入1ml的稀釋緩沖液
將10ul的樣本加入試管中
混勻樣本，重溶好標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品
每次實(shí)驗(yàn)選擇好所需要的板條。不使用的板條應(yīng)重新與干燥劑一起于密封袋中，保存在2-8℃。
將板條固定于板架上
移取100ul 的稀釋緩沖液當(dāng)零標(biāo)準(zhǔn)品
加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、稀釋的樣本至相應(yīng)的孔中
每孔加入50ul的酶聯(lián)物溶液
在室溫下溫育2小時(shí)
倒出孔中溶液
洗板3次
在洗板后的15分鐘內(nèi)，每孔加入100ul的顯色劑
于室溫下溫育30分鐘
每孔加入100ul的終止液
在1小時(shí)內(nèi)450nm酶標(biāo)儀下讀數(shù)（參考波長(zhǎng)為630nm或者650nm）。
7.應(yīng)用范圍
該試劑盒為酶聯(lián)免疫試驗(yàn)檢測(cè)人血清中的胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3（IGFBP-3）。
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